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鱟試驗細菌內毒素檢測注意事項

發布時間:2015-11-19
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鱟試驗是利用鱟的阿米巴細胞與微量內毒素產生凝集反應的現象,判斷樣品中細菌內毒素限量是否符合規定的一種方法。它具有比家兔法更簡便、快速、靈敏度高、重現性好等優點。但是該法受到許多因素的影響,故在做鱟試驗檢查時,應注意下列問題。


1 鱟試劑靈敏度

藥典規定每批鱟試劑在用于試驗前首先核對靈敏度。因為鱟試劑由于生產廠家不同,部分鱟試劑檢測同一檢品時,用相同標示值的鱟試劑,出現不同結果。因而先核對靈敏度可避免因鱟試劑本身造成的判斷失誤。


2 操作條件

2.1 操作熟練程度

操作時應該將手用酒精消毒,安瓿開啟前應先用砂石劃痕(不管是色點或包環易折安瓿),用手半拉半掰將頸部折斷,千萬不能用鑷子敲擊,防止碎玻屑掉入安瓿。在鱟試劑的溶解、樣品的稀釋及加入時,取樣均應準確,緩緩加入避免氣泡。雙手避免在安瓿或試管的上方來回移動,加樣后用封口膜迅速封閉管口,并立即放入恒溫水浴箱中,操作要快,否則易致假陽性的出現。

2.2 溫度

溫度對鱟試劑的靈敏度影響很大,隨著溫度的升高以及延長保溫時間,鱟試劑的靈敏度亦增大,增加假陽性。溫度過高會破壞鱟試劑。應控制在(37±1)℃之間,保溫(60±2)min。

2.3 試驗用的試管架最好專門定制,眼孔直徑應與安瓿或試管直徑相接近,左右晃動。水浴箱要放置不要傾斜,保溫過程中不可隨時取出觀察。防止試管受到振動鱟試劑與細菌內毒素形成的凝膠受到振動后易變形而誤判為陰性。


3 其它

3.1 供試品稀釋

選用更高靈敏度的鱟試劑,則應增加樣品的稀釋倍數。

3.2 所用器皿均應徹底洗凈和滅菌安全

實驗用器皿均應充分洗滌并沖洗干凈,特別是接觸酸堿或用洗衣粉、洗液等洗滌后,更應沖洗干凈,以免殘留物破壞極微量的內毒素。


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